微生物質(zhì)譜鑒定的工作原理是將微生物具有種屬特異性的核糖體蛋白建立質(zhì)譜指紋數(shù)據(jù)庫,通過采集未知菌的圖譜與數(shù)據(jù)庫的譜圖進行比對,從而實現(xiàn)對微生物的種類鑒定,具有快、準、穩(wěn)、省的優(yōu)點。
目前,致病菌識別鑒定技術主要有傳統(tǒng)的生化方法、基于DNA的擴增、雜交方法、基于蛋白和多糖的免疫學方法,生化方法一直被認為是鑒定菌株的金標準,但是任何一株菌都需要多項生化反應結(jié)果相互驗證才能最終完成鑒定,即使現(xiàn)在的全自動生化鑒定系統(tǒng)鑒定菌株最少也需要4~5h,且全自動生化鑒定系統(tǒng)并不能覆蓋鑒定工作中的所有微生物。
一、那么微生物質(zhì)譜鑒定是如何實現(xiàn)對微生物進行檢測的呢?
它是通過檢測待測微生物核糖體蛋白的肽質(zhì)量指紋圖譜,并且將檢測到的圖譜與數(shù)據(jù)庫中的微生物標準指紋圖譜進行匹配檢索,從而完成微生物鑒定的。
二、有哪些優(yōu)勢?
相對于傳統(tǒng)鑒定方法,基于質(zhì)譜的微生物鑒定方法具有鑒定速度快、通量高、準確性高、操作簡單及成本低廉等顯著優(yōu)勢。
三、對樣本的要求:
待檢樣本必須是經(jīng)培養(yǎng)基分離后的純化菌落。臨床微生物實驗室常使用商品化培養(yǎng)基,包含哥倫比亞血瓊脂、沙保氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等。為了滿足鑒定準確性的要求,須采用如表所示時間新鮮培養(yǎng)的菌株。